利用激光捕捉顯微分離法來(lái)擷取硬化肝及非硬化中之肝星狀細(xì)胞,淬取其 RNA,反轉(zhuǎn)錄后作競(jìng)爭(zhēng)性 PCR,以定量 MMP 及TIMP 的表現(xiàn)。
我們?cè)囉昧死鋬鼋M織及福馬林固定之組織切片做激光捕捉顯微分離法(LCM)。LCM 每次約捕捉 5 個(gè)細(xì)胞。以 actin為引子所作之 RTPCR 顯示只有在冷凍組織切片才能粹取出 mRNA。
大約要 100 個(gè)細(xì)胞的 mRNA 才作的出 actin 之 RTPCR。
我們用抗平滑肌 actin 及抗 desmin 抗體來(lái)分辨肝星狀細(xì)胞。只有在福馬林固定之切片染得出星狀細(xì)胞。由于其細(xì)長(zhǎng)的形狀及緊靠在肝細(xì)胞旁,使得單獨(dú)分離不可能。因此以雷射捕捉顯微分離法來(lái)分析肝星狀細(xì)胞基
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