恒冷箱切片是光鏡酶組織化學中常用的佳切片
根據(jù)實驗需要,切片可用恒冷箱切片、組織切片機切片、振動切片機切片和刀片手切等。 恒冷箱切片是光鏡酶組織化學中常用的佳切片。新鮮組織或固定材料在恒定的冷室、恒定的溫度下能制成厚薄均勻的、無人工假象的切片。這種切片可作為電鏡酶細胞化學實驗的預(yù)試驗和并行觀察。尤其是定量酶細胞化學,一般用光鏡組織化學反應(yīng)進行定量測定,用電鏡酶細胞化學反應(yīng)確定酶的定位差異,兩者結(jié)果互為補充。 冰凍組織時.細胞質(zhì)和細胞間質(zhì)的溫度從冰點(約一2℃)到再結(jié)晶點(一130'C)之間會產(chǎn)生冰晶。冰晶的形成是由于大結(jié)晶吸收小結(jié)晶的水分而產(chǎn)生的。冰凍時為防止產(chǎn)生冰晶,漂洗后的固定組織可置30%蔗糖液中處理12-24h,開始時組織塊是浮的,后沉入瓶底即可置恒冷箱切片機冷凍臺上.也可用進口的專用冷凍包埋劑處理,效果更好。在冷凍臺的組織里液氮中速凍10min,待組織塊溫度與冷室溫度達到平衡時切片。冷凍時常用液氮或其它冷凍劑。固定組織塊冷凍后,由于組織塊過度變硬,溫度低于一20℃時傷刀,要升高箱內(nèi)溫度至合適溫度。
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