分光光度法顯微測定氨基酸的濃度色譜法分辨率
假如在起點使用的一滴混合物的體積是已知的,那么,可以測定出每一種氨基酸的濃度。為此,把每種氨基酸斑點從色譜上剪下來,并把有色斑點溶解于適當?shù)娜軇?,然后用分光光度法測定它的濃度,以上種種都是測定操作所必需的。 氨基酸也可以用電泳法分離。這種技術(shù)是把氨基酸混合物施于經(jīng)緩沖液浸沮的濾紙或凝膠條上,并接通高壓電流,在使用的特定pH下,不同的氨基酸帶有不同的凈電荷,因而在電場中遷移,遷移的方向和速度取決于氨基酸上電荷的性質(zhì)和大小,這樣便達到分離的目的。色譜法和電泳法相結(jié)合可達到氨基酸的佳分析。 有理由表明.近年來許多主要的生化發(fā)現(xiàn)都足由于把色譜法及其各種各樣的改良形式應(yīng)用于生化問題研究的結(jié)果。近,G.Leaf把注意力投到由P. B. Hamilton所發(fā)現(xiàn)的一種有很高分辨力的新色譜系統(tǒng)上(該法能夠把層析譜上以幾乎同樣速度“跑”的混合物質(zhì)分成不連續(xù)的斑點)。例如,應(yīng)用該法,在正常尿液中可以展現(xiàn)出多達150個呈“茚三酮陽性”的物質(zhì)。通常使用的色譜法分辨率很低。
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