在適條件下對(duì)酸雙脂酶進(jìn)行分解的化學(xué)方法 (1)堿分解。已經(jīng)知道堿能劈開(kāi)磷酸醋鍵成為RNA的核搪的5-OH基,并從鏈的中部產(chǎn)生2和3一核普磷酸,并在磷酸化的條件下從分子的5一端產(chǎn)生一核普二磷酸,而在非磷酸化條件下從3一端產(chǎn)生一核普。 (2)過(guò)碘酸根氧化繼以胺分裂。理論上這個(gè)方法適千使低級(jí)核若酸鏈從3一端逐步分解。在3一端磷酸化的條件下,末端3一磷酸先被磷酸單醋酶除棄。然后低級(jí)核曹酸鏈用過(guò)碘酸根處理以氧化末端核褚的2和a碳分子上的經(jīng)根。在隨后用一種胺處理時(shí),形成一種不穩(wěn)定的胺復(fù)合物,它分裂而產(chǎn)生第一核普酸根的游離堿和第二核昔酸根的暴露的3-磷酸根。IR復(fù)這些步驟引致堿從3一端的逐步釋放。假定的作機(jī)制如下。 在磷酸單醋酶的影響下TMV-RNA釋放相當(dāng)于3000到5000核普酸的無(wú)機(jī)磷酸根。這被解釋為表明大約有6500核普酸的每一完整的RNA分子多帶有一個(gè)末端磷酸根,更多的磷酸根端是由于鏈的破裂而產(chǎn)生的。后來(lái)用沒(méi)有核酸酶的特別純凈的RNA制備物發(fā)現(xiàn),經(jīng)過(guò)E. coli-磷酸單酮酶消化后從TMV-RNA釋放的磷酸根比分子墾I分子量RNA少得多。 這說(shuō)明TMV-RNA的3一端沒(méi)有磷酸化。這個(gè)結(jié)論得到在適條件下用蛇毒確酸雙脂酶進(jìn)行分解時(shí)每分子量RNA產(chǎn)生少于一分子量核昔酸2一雙磷酸的發(fā)現(xiàn)所支持。
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